Validación de matrices para control de esterilidad (BACTALERT)

Información técnica

Utilidad

La contaminación bacteriana o fúngica de los productos de origen humano (PoHo) puede producir morbilidad y mortalidad en los receptores. Las posibles fuentes de contaminación incluyen bacteriemia asintomática del donante en el momento de la donación y la ejecución incorrecta de las técnicas asépticas durante la producción.

La Farmacopea Europea prevé en el capítulo 2.6.27 que se puedan utilizar métodos automáticos de control de esterilidad. El sistema BACT/ALERT® utiliza un principio de detección basado en el dióxido de carbono generado por el crecimiento microbiano asociado al metabolismo de los sustratos del medio de cultivo, lo que se traduce en un cambio de pH, y finalmente, provoca un cambio de color irreversible del indicador del fondo del frasco. Este sistema es ventajoso en cuanto a la rapidez que proporciona en la detección y recuperación microbiana, ya que se obtienen los resultados en un tiempo máximo de 14 días a través de la lectura continuada y, además, la notificación de muestras positivas es inmediata. Las muestras a analizar se someten a una manipulación mínima ya que solo se necesita inocular los frascos e introducirlos en el armario BACT/ALERT para su incubación. La lectura del color es automática, no hay interferencias por turbidez y es un método no destructivo que permite una identificación microbiana posterior y antibiograma, si procede.

Según la Farmacopea Europea y las normas de correcta fabricación, antes de realizar el control de esterilidad de un medio, reactivo o producto celular, es necesario validar que la matriz no interfiera con el método de control, produciendo falsos resultados positivos o falsos resultados negativos. Por este motivo, es necesario realizar la validación de la matriz antes de emplear el método BACT/ALERT.

Método

Según la Farmacopea Europea, se valida:

• La especificidad (ausencia de resultados falsamente positivos)

• La sensibilidad (capacidad de detección de 100 unidades formadoras de colonias UFC o menos) de las cepas recomendadas por la Farmacopea Europea

• La reproducibilidad (se realizan 3 réplicas) del BACT/ALERT para la matriz en estudio.

Además, se verifica con un test de promoción del crecimiento que los frascos y medios de cultivo empleados son fértiles y no están contaminados.

En caso de productos celulares se sigue el capítulo 2.6.27 de la Farmacopea Europea. En caso de medios y reactivos se sigue el capítulo 2.6.1 de la Farmacopea Europea.

El código de las validaciones en el Banc de Sang i Teixits es V-LC-020 y V-LMB-007.

Algoritmo diagnóstico

En caso de detectar crecimiento microbiano, se procede a realizar una tinción de Gram, sembrar en placa y hacer la identificación del microorganismo por MALDI-TOF.

Resultados

El resultado esperado es:

• Un resultado NEGATIVO de BACT/ALERT en el control negativo (frasco sin microorganismo inoculado)

• Un resultado POSITIVO de BACT/ALERT y la detección de las cepas correspondientes en los controles positivos (frasco con microorganismo inoculado)

• Un resultado POSITIVO de BACT/ALERT y la detección de las cepas correspondientes en las muestras (frasco con matriz y microorganismo inoculado)

Este resultado esperado indica que la matriz no interfiere y que se puede realizar el control de esterilidad con BACT/ALERT. Cualquier desviación respecto al resultado esperado está fuera de especificaciones y se debe investigar.

Precauciones

Es necesario realizar la validación de la matriz antes de realizar por primera vez un control de esterilidad por BACT/ALERT en una matriz (reactivo, medio, producto celular, etc.)

Tiempo de respuesta

• 20 días

Información sobre el espécimen

Muestra: Matriz que se quiere validar

Tubs: Frasco BACT/ALERT (ver detalle en la Ficha de la prueba Control de esterilidad BACT/ALERT)

Estabilidad: Transportar tan pronto como sea posible al laboratorio.

Instrucciones de transporte: Temperatura ambiente.

Motivo de rechazo: Muestra no identificada, muestra insuficiente, etc.

Información administrativa

Código BST: 61801 para productos celulares y 61800 para reactivos

Código BST antiguo:

Descripción de la prueba: Perfil-Validación BACT/ALERT productos y Perfil-Validación BACT/ALERT reactivos

Sinónimos: Validación de matriz para BACT/ALERT

Sección: Microbiología

Tarifa BST: Consulte las tarifas actualizadas aquí.

Perfiles
No aplica

Referencias

• Guide to the quality and safety of tissues and cells for human application. 5th edition EDQM, 2022

• Farmacopea Europea 11ena edició, 2023

• NCF: Guía de Normas de Correcta Fabricación de Medicamentos de Uso Humano y Veterinario. Anexo 1

• NCF Parte IV: Directrices sobre normas de correcta fabricación específicas para Medicamentos de Terapia Avanzada.

• Guia de l'usuari del BACT/ALERT 3D (Biomérieux)

• Instruccions dels flascons iFA Plus, iFN Plus, FA Plus, FN Plus, BPA, BPN, iAST, iASN