Validación de matrices para la detección de Mycoplasma (qPCR)

Información técnica

Utilidad

La determinación de la contaminación por Mycoplasma en el material de partida, productos intermedios y productos finales de medicamentos celulares, es necesaria como control de calidad del proceso productivo, según las Normas de Correcta Fabricación (NCF).

La Farmacopea Europea prevé en el capítulo 2.6.7 que se puedan utilizar métodos moleculares de qPCR para detectar Mycoplasma.

Según la Farmacopea Europea y las normas de correcta fabricación, antes de realizar el control de Mycoplasma de un medio, reactivo o producto celular, es necesario validar que la matriz no interfiera con el método de control, produciendo falsos resultados positivos o falsos resultados negativos. Por este motivo, es necesario realizar la validación de la matriz antes de emplear el método de qPCR de Mycoplasma.

Método

Siguiendo la Farmacopea Europea, se valida:

• La especificidad (ausencia de resultados falsamente positivos)

• La sensibilidad (capacidad de detección de 10 unidades formadoras de colonias CFU o menos) de las 6 cepas recomendadas por la Farmacopea Europea

• La reproducibilidad (se realizan 2 réplicas)

• La ausencia de inhibición de la PCR (control interno)

Se sigue el capítulo 2.6.7 de la Farmacopea Europea.

El código de las validaciones en el Banc de Sang i Teixits es V-LC-027.

Algoritmo diagnóstico

No aplica.

Resultados

El resultado esperado es:

• Un resultado NEGATIVO de Mycoplasma en el control negativo (sin Mycoplasma)

• Un resultado POSITIVO de Mycoplasma en el control positivo (con Mycoplasma)

• Un resultado POSITIVO en la amplificación del control interno

• Un resultado POSITIVO de Mycoplasma en las muestras (matriz con cepa de Mycoplasma añadida, para cada una de las 6 cepas testadas)

Este resultado esperado indica que la matriz no interfiere y que se puede realizar el control de Mycoplasma por qPCR. Cualquier desviación respecto al resultado esperado está fuera de especificaciones y debe investigarse.

Precauciones

No aplica.

Tiempo de respuesta

• 10 días

Información sobre el espécimen

Muestra: Producto, medio o reactivo

Tubos: Tubo estéril

Estabilidad: Congelado 1 mes.

Instrucciones de transporte: Preferiblemente congelado.

Motivo de rechazo: Muestra no identificada, etiqueta ilegible, etc.

Información administrativa

Código BST: 75801

Código BST antiguo: CEL056

Descripción de la prueba: Validación de matrices para la detección de Mycoplasma

Sinónimos: Validación Mycoplasma

Sección: Microbiología

Tarifa BST: Consulte las tarifas actualizadas aquí.

Perfiles
No aplica

Referencias

• Farmacopea Europea 11ena edició