Tipificación HLA-DRB3/DRB4/DRB5 de alta resolución

Información clínica

Utilidad diagnóstica:

La tipificación HLA de alta resolución nos permite determinar el tipaje HLA a nivel alélico (4 dígitos). La tipificación de los loci HLA-DRB3, HLA-DRB4, HLA-DRB5 es de especial interés en donantes para poder valorar la presencia de anticuerpos donante específicos en los pacientes trasplantados. Por otro lado, la tipificación del locus HLA-DRB3 tiene aplicabilidad para la identificación del alelo HLA-DRB3*01:01 asociado a inmunización contra el antígeno plaquetario HPA-1a en el contexto de la púrpura trombocitopénica aloinmune neonatal (NAITP).

Método:

La técnica PCR-NGS (estrategia Long) permite la tipificación HLA de alta resolución de genes HLA de clase I y II y de genes HLA no clásicos. Esta técnica consta de diversas fases: amplificación de los genes HLA de interés mediante PCR, preparación de librerías, secuenciación y análisis de resultados. Con la estrategia Long (fragmentos largos) se obtiene la secuenciación del gen completo mientras que con la estrategia Short (fragmentos cortos) se secuencian los de exones 2, 3 y 4 de los genes HLA-A, -B y -C y de exones 2 y 3 de los genes HLA-DRB1, HLA-DRB3, HLA-DRB4, HLA-DRB5, -DQB1, -DPB1, -DQA1 y -DPA1.

Valores de referencia

Los alelos de HLA-DRB1 están asociados con uno o ningún gen DRB3, DRB4 y DRB5. A modo de ejemplo estos serían algunos posibles resultados que podríamos obtener para cada gen al realizar la tipificación HLA de alta resolución: HLA-DRB3*02:02, DRB4:01:03, DRB5*01:01.

Algoritmo diagnóstico:

No aplica.

Tiempo de respuesta:

El tiempo de respuesta en la tipificación HLA de alta resolución depende del origen de la muestra:

• Paciente o familiares de paciente candidato a trasplante de progenitores hematopoyéticos (20 días laborables).
• Registro de donantes voluntarios (20 días laborables).
• Ampliación de tipificación HLA en donantes voluntarios (10 días laborables).
• Registro de unidades de sangre de cordón umbilical (20 días laborables).
• Verificación de unidades de sangre de cordón umbilical (20 días laborables).
• Confirmatorio pre-trasplante de donante y receptor (20 días laborables).

Información sobre el espécimen

Muestra: Sangre total
Tubo: Tubo EDTA K3 4 ml
Volumen mínimo: 500µl.

Estabilidad:

• En refrigeración: 2 semanas.
• A -20ºC: a partir de 2 semanas.

Instrucciones de transporte: Preferiblemente a temperatura ambiente

Motivo de rechazo: Muestra coagulada

Información administrativa

Código BST: LRD2058A, LRD2058B, LRD2058C
Descripción de la prueba: Tipificación HLA-DRB3 / DRB4 / DRB5 alta resolución
Sinónimos: No aplica
Sección: Histocompatibilidad e Inmunogenética
Tarifa BST: Consulte las tarifas actualizadas aquí.
Perfiles: No aplica.

Referencias

• Manual dels “Standards for Histocompatibility Testing” de l’EFI (darrera versió).